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植物樣本基因組DNA提取試劑盒

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01

自動化植物樣本基因組DNA提取說明書

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215K

常見問題

一:(DNA)植物樣本處理量不確定問題的解決方案

對于植物樣本,樣本處理量無法統一確定,對于一般樣本(煙草,擬南芥等),提取量不超過100mg鮮重組織或者20mg干重組織,對于復雜樣本(水稻,玉米,榆樹等),建議初始樣本量不超過50mg鮮重或者10mg干重組織;如果需要較高的DNA量,可以采取多管濃縮的方法提取DNA;

二:(DNA)如何處理短時間內無法低溫處理的DNA樣本?

對于植物樣本,如果短時間不能低溫處理,建議使用硅膠顆粒干燥樣本,防止DNA嚴重降解;研磨處理材料過程中盡量不要過量,否則會導致DNA產量低;材料過量也會使樣本出現團塊無法裂解,導致離心柱堵塞,無法獲得高質量DNA;

三:DNA提取中A260/280比值波動是什么原因

對于基因組DNA提取,A260/280值如果低于1.7說明有可能存在蛋白污染,如果值大于1.9,說明可能存在RNA污染;如果洗脫樣本時沒有使用Buffer EB,而使用ddH20,比值或偏低,因為Ph值會影響吸光值,并不表示樣本純度低;

四:(DNA)離心柱漂洗完成后需要注意什么

離心柱漂洗完成后,盡可能烘干柱膜上殘留乙醇,殘留乙醇會影響洗脫效率和下游實驗效果;如果A260/230值過低,說明樣本提取過程中,漂洗不徹底,有鹽離子殘留,建議增加漂洗次數;

五:(DNA)試劑盒中Buffer EB含微量EDTA怎樣處理

試劑盒中Buffer EB中含有少量EDTA,可能影響下游實驗,使用時適當稀釋,如果用其他洗脫液洗脫,要確保PH>7.5,PH過低影響洗脫效率。

六:(DNA)基因組DNA樣本儲存需要注意什么

待提取樣本盡量避免反復凍融,否則會導致提取的DNA片段降解或者DNA得率嚴重下降。

七:血液樣本DNA提取注意事項

對于血液樣本,最好使用新鮮血液樣本或者4℃存放少于2天的樣本,否則會嚴重降低DNA產量;盡量避免反復凍融(不超過3-5次),每一次凍融都會降低DNA得率;

如果樣本中含有血塊,說明樣本收集時未加入血液抗凝劑;建議重新收集樣本并加入EDTA,肝素,檸檬酸等抗凝;在使用紅細胞裂解液處理血液時,確保血液樣本已經恢復到室溫狀態;處理過程中盡可能混勻樣本,防止紅細胞裂解不完全;

十:細菌樣本DNA提取方法

對于細菌樣本DNA提取,試劑盒中的溶菌酶可以裂解大部分革蘭式陽性細菌,對于特殊細菌如葡萄球菌,需要提高溶菌酶用量(建議10mg/ml溶菌酶使用量增加一倍)和溶葡萄球菌酶(Lysostaphin)共同使用;

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